凝膠電泳原理

凝膠電泳（英語：Gel electrophoresis）或稱膠體電泳，是一種用于大分子（如DNA、RNA、蛋白質(zhì)）以及其碎片的分離、分析技術(shù)。該技術(shù)被科學(xué)工作者用于分離具有不同物理性質(zhì)（大小、電荷、等電點(diǎn)）的分子。凝膠電泳通常用于分析用途，但也可以作為預(yù)處理技術(shù)，在進(jìn)行質(zhì)譜、聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)、克隆、DNA測序或者免疫印跡等檢測之前，進(jìn)行分子的純化。（維基）

電泳的定義：施加電場后，離子和帶電大分子在基質(zhì)中的運(yùn)動。

瓊脂糖和聚丙烯酰胺是蛋白核酸等大分子電泳基質(zhì)。大分子因為大小、電荷和結(jié)構(gòu)的不同在電泳基質(zhì)中分離。

蛋白分離基礎(chǔ)：大小、結(jié)構(gòu)、電荷。

核酸分離基礎(chǔ)：主要是大小。堿基組成和序列對電泳速度影響較小。

在分離蛋白質(zhì)和在分離小核酸時凝膠通常由不同濃度的丙烯酰胺和交聯(lián)劑聚合而成；分離大一點(diǎn)的核酸時（長度超過幾百個堿基），純化的瓊脂更適合作為基質(zhì)。

大分子電泳電學(xué)基礎(chǔ)：

歐姆定律：V=IR

W=IV

電泳期間，其中一個參數(shù)固定，其余兩個隨著電泳系統(tǒng)電阻的變化而改變。

垂直系統(tǒng)中，導(dǎo)電離子如氯離子電泳出膠后，凝膠電阻會增加。

水平系統(tǒng)中，電阻變化很小。不過，高壓和增加跑膠長度能降低電阻。

固定不同參數(shù)各有優(yōu)缺點(diǎn)。

測序凝膠一般固定功率，以保持溫度的一致。

用于蛋白質(zhì)和DNA分離的瓊脂糖和聚丙烯酰胺凝膠一般固定電壓或電流。

Reference

1. Rickwood, D. and Hames, B.D., Gel Electrophoresis of Nucleic Acids: A Practical Approach, IRL Press Limited, 1982.

上海紅榮微再公司在中國代理銷售的LONZA瓊脂糖系列產(chǎn)品是由位于美國Rockland的子公司生產(chǎn)，該子公司主要研發(fā)生產(chǎn)：分子生物學(xué)和基于細(xì)胞檢測的生物技術(shù)類產(chǎn)品。分子生物學(xué)產(chǎn)品主要包括DNA/RNA分離、蛋白分離的等電聚焦凝膠電泳類產(chǎn)品；細(xì)胞檢測類的產(chǎn)品有體外毒理檢測、藥物篩選研究、細(xì)胞健康檢測；LONZA瓊脂糖粉已經(jīng)成為世界上zui大的瓊脂糖粉生產(chǎn)供應(yīng)商，產(chǎn)品不僅僅應(yīng)用在*范圍內(nèi)的學(xué)術(shù)研究、政府公共研究、生物技術(shù)公司、生物制藥公司，更重要的是現(xiàn)在已經(jīng)成功進(jìn)入個人護(hù)理、化妝品和醫(yī)療等廣泛的應(yīng)用領(lǐng)域，被譽(yù)為世界上技術(shù)zui高、質(zhì)量的瓊脂糖產(chǎn)品。

LONZA瓊脂糖粉產(chǎn)品系列

在等電聚焦凝膠電泳類產(chǎn)品中，LONZA瓊脂糖粉分為：低熔點(diǎn)瓊脂糖粉（Low Melting Agarose）、高分辨率瓊脂糖粉（High Sieving Agarose）、標(biāo)準(zhǔn)熔點(diǎn)瓊脂糖粉（Standard Melting Agarose）和其它應(yīng)用瓊脂糖粉。下面為LONZA瓊脂糖粉詳細(xì)介紹：

分子生物學(xué)級別的瓊脂糖粉：SeaKem LE，SeaPlaque和NuSieve 3:1。

遺傳學(xué)技術(shù)級別的瓊脂糖粉：SeaKem GTG，SeaPlaque GTG，NuSieve GTG，Seakem Gold和Incert。

LONZA瓊脂糖粉的分類：

①標(biāo)準(zhǔn)熔點(diǎn)瓊脂糖粉

SeaKem LE瓊脂糖粉：

屬分子生物學(xué)級別，是進(jìn)行核酸電泳和印跡分析的理想凝膠。每塊凝膠均能提供清晰的DNA條帶及一致的分辨能力。不含可檢測到的DNase和RNase活性，具有高強(qiáng)度、低背景等優(yōu)點(diǎn)。因其電滲（EEO）較低，故DNA在凝膠中的遷移速度較快。同時可在Ouchterlony和放射免疫擴(kuò)散（RID）實(shí)驗中進(jìn)行蛋白凝膠電泳。（為保證對DNA修飾酶產(chǎn)生zui小的抑制作用，特推薦使用SeaKem GTG瓊脂糖，因為這種遺傳學(xué)技術(shù)級別的瓊脂糖能與限制性消化，DNA連接和克隆等操作中所使用的酶高度兼容。）

SeaKem LE瓊脂糖粉的應(yīng)用：DNA和RNA的電泳和印跡、免疫沉淀。

廠家品牌 貨號   產(chǎn)品名稱                包裝規(guī)格

LONZA  50001  Seakem LE Agarose瓊脂糖粉 25g

LONZA  50000  Seakem LE Agarose瓊脂糖粉 125g

LONZA  50004  Seakem LE Agarose瓊脂糖粉 500g

SeaKem GTG瓊脂糖粉

屬遺傳學(xué)技術(shù)級別，是標(biāo)準(zhǔn)膠凝溫度，高凝膠強(qiáng)度的瓊脂糖。可分辨大于1000bp的DNA fragment。主要用于DNA電泳從“SeaKem GTG瓊脂糖”凝膠中回收的DNA可放心的用于限制性消化和連接反應(yīng)。

SeaKem GTG瓊脂糖粉的應(yīng)用：DNA和RNA回收、DNA和RNA的電泳及印跡。

廠家品牌 貨號      產(chǎn)品名稱             包裝規(guī)格  

LONZA  50071 Seakem GTG Agarose瓊脂糖粉 25g

LONZA  50070 Seakem GTG Agarose瓊脂糖粉 125g

LONZA  50074 Seakem GTG Agarose瓊脂糖粉 500g

NuSieve 3:1瓊脂糖粉

屬分子生物學(xué)級別，標(biāo)準(zhǔn)熔點(diǎn)，用于制備適于鑒定小片段DNA，RNA和≦1kb的PCR產(chǎn)物的高強(qiáng)度凝膠。主要用于分析電泳，以提高跑膠和印跡的速度。其性能檢測確保10bp-1500bp范圍的DNA fragment均能獲得良好的分辨效果。（如果您需要使用低熔點(diǎn)瓊脂糖，特推薦NuSieve GTG瓊脂糖 產(chǎn)品，研究證實(shí)其適用于那些需要與克隆實(shí)驗中所使用的酶*兼容的應(yīng)用。）

NuSieve 3:1瓊脂糖粉的應(yīng)用：小片段DNA和RNA分析，小片段DNA和RNA的Southern blotting和Northern blotting。

廠家品牌 貨號    產(chǎn)品名稱                包裝規(guī)格

LONZA  50091  NuSieve 3:1 Agarose瓊脂糖粉 25g

LONZA  50090  NuSieve 3:1 Agarose瓊脂糖粉 125g

LONZA  50094  NuSieve 3:1 Agarose瓊脂糖粉 500g

②低熔點(diǎn)瓊脂糖粉

SeaPlaque瓊脂糖粉：

屬分子生物學(xué)級別，是一種低熔點(diǎn)瓊脂糖，所制凝膠具有更高的篩過特性，更透明。是理想的DNA和RNA電泳產(chǎn)品，也適合組織培養(yǎng)細(xì)胞的克隆和病毒空斑分析。

為保證在凝膠中進(jìn)行的DNA酶反應(yīng)不受影響，特推薦使用SeaPlaque GTG瓊脂糖，這種瓊脂糖已被證明其對一些常規(guī)性的用于膠內(nèi)操作（如限制型消化，克隆）的酶顯示出zui小的抑制作用。DNase和RNase活性未檢測到。

SeaPlaque瓊脂糖粉的應(yīng)用：DNA和RNA電泳、病毒空斑檢測、細(xì)胞培養(yǎng)細(xì)胞的克隆。

廠家品牌 貨號 產(chǎn)品名稱                  包裝規(guī)格

LONZA  50101 SeaPlaque AGAROSE瓊脂糖粉 25G

LONZA  50100 SeaPlaque AGAROSE瓊脂糖粉 125G

SeaPlaque GTG瓊脂糖粉

屬遺傳學(xué)技術(shù)級別，用于分離大于1000bp的DNA和PCR產(chǎn)物片段。這種低熔點(diǎn)瓊脂糖zui適于直接對重熔瓊脂糖中的核酸進(jìn)行酶學(xué)操作，而無需額外的DNA純化步驟；也適合在重熔瓊脂糖凝膠中進(jìn)行PCR及測序反應(yīng)。

 SeaPlaque GTG瓊脂糖粉的應(yīng)用：大片段DNA的分析和回收、凝膠內(nèi)PCR反應(yīng)（In-gelPCR）、凝膠內(nèi)（In-gel）連接和轉(zhuǎn)化實(shí)驗、DNA和RNA的消化。

廠家品牌 貨號  產(chǎn)品名稱                   包裝規(guī)格  

LONZA 50111 SeaPlaque GTG AGAROSE瓊脂糖粉 25G  

LONZA 50110 SeaPlaque GTG AGAROSE瓊脂糖粉 125G  

 SeaPrep瓊脂糖粉

是一種*的“軟瓊脂糖”，具有超低的膠凝及熔化溫度。用于雜交瘤克隆及制造軟的，高純度凝膠。它以一種嚴(yán)格的具有代表性的模式擴(kuò)增cDNA文庫，減少在擴(kuò)增的過程中由于不同復(fù)制率所引起的低豐度克隆丟失的可能性。

 SeaPrep瓊脂糖粉的應(yīng)用：細(xì)胞培養(yǎng)、雜交瘤克隆、封裝/包埋細(xì)胞。

廠家品牌 貨號     產(chǎn)品名稱          包裝規(guī)格  

LONZA  50302 SeaPrep Agarose瓊脂糖粉 25g  

NuSieve GTG瓊脂糖粉

屬遺傳學(xué)技術(shù)級別，低熔點(diǎn)，能有效的分辨10bp-1000bp的DNA fragment, PCR和RT-PCR產(chǎn)物；使用該瓊脂糖制備凝膠不僅易于操作并且可保證不同批次產(chǎn)品間一致的電泳遷移速度，可直接在重熔NuSieve GTG瓊脂糖中進(jìn)行克隆操作，無需DNA的抽提步驟。這種瓊脂糖也適用于各種需在重熔瓊脂糖凝膠中進(jìn)行的反應(yīng)。該產(chǎn)品經(jīng)檢測并證實(shí)能夠支持在重熔瓊脂糖凝膠中直接進(jìn)行DNA連接和轉(zhuǎn)化。

 NuSieve GTG瓊脂糖粉的應(yīng)用：小片段DNA的分析和回收、凝膠內(nèi)PCR反應(yīng)（In-gelPCR）凝膠內(nèi)（In-gel）連接和轉(zhuǎn)化實(shí)驗。

廠家品牌 貨號       產(chǎn)品名稱            包裝規(guī)格  

LONZA  50081 NuSieve GTG Agarose瓊脂糖粉 25g   

LONZA  50080 NuSieve GTG Agarose瓊脂糖粉 125g  

LONZA  50084 NuSieve GTG Agarose瓊脂糖粉 500g  

③高分辨率瓊脂糖粉

MetaPhor瓊脂糖粉

是一種中熔點(diǎn)瓊脂糖，提供兩倍于的篩過瓊脂糖產(chǎn)品的分辨能力。MetaPhor瓊脂糖可用于水平凝膠電泳分辨20bp-800bp的DNA fragment,PCR和RT-PCR產(chǎn)物，分辨能力約為DNA fragment大小的2%。MetaPhor瓊脂糖凝膠（2%-4%）與聚丙烯酰胺凝膠（4%-8%）的分辨率接近。這些凝膠zui適于分辨AMPFLPs,STRs,三核苷酸和四核苷酸重復(fù)序列。

 MetaPhor瓊脂糖粉的應(yīng)用：小片段PCR產(chǎn)物分析、STR分析、RT-PCR。

廠家品牌 貨號        產(chǎn)品名稱         包裝規(guī)格  

LONZA  50181 MetaPhor Agarose瓊脂糖粉 25g  

LONZA  50180 MetaPhor Agarose瓊脂糖粉 125g  

LONZA  50184 MetaPhor Agarose瓊脂糖粉 500g  

NuSieve 3:1瓊脂糖粉

屬分子生物學(xué)級別，標(biāo)準(zhǔn)熔點(diǎn)，用于制備適于鑒定小片段DNA，RNA和≦1kb的PCR產(chǎn)物的高強(qiáng)度凝膠。主要用于分析電泳，以提高跑膠和印跡的速度。其性能檢測確保10bp-1500bp范圍的DNA fragment均能獲得良好的分辨效果。（如果您需要使用低熔點(diǎn)瓊脂糖，特推薦NuSieve GTG瓊脂糖 產(chǎn)品，研究證實(shí)其適用于那些需要與克隆實(shí)驗中所使用的酶*兼容的應(yīng)用。）

 NuSieve 3:1瓊脂糖粉的應(yīng)用：小片段DNA和RNA分析、RT-PCR，小片段DNA和RNA的Southern blotting和Northern blotting。

廠家品牌 貨號   產(chǎn)品名稱               包裝規(guī)格  

LONZA  50091 NuSieve 3:1 Agarose瓊脂糖粉 25g  

LONZA  50090 NuSieve 3:1 Agarose瓊脂糖粉 125g  

LONZA  50094 NuSieve 3:1 Agarose瓊脂糖粉 500g  

④Identity瓊脂糖粉

I.D.NA瓊脂糖粉

是一種高強(qiáng)度的低滲瓊脂糖，用于在DNA鑒定測試中保證DNA分辨能力的一致性。經(jīng)證實(shí)，在DNA鑒定實(shí)驗條件下可獲得區(qū)分VNTRs,HVRs,RFLPs及DNA大小標(biāo)準(zhǔn)物所需的清晰明亮的DNA條帶。這種瓊脂糖顯示出較高的印跡DNA轉(zhuǎn)移效率和DNA圖譜分析所需的不同批號產(chǎn)品的一致性。

 I.D.NA瓊脂糖粉的應(yīng)用：DNA鑒定測試。

廠家品牌 貨號     產(chǎn)品名稱        包裝規(guī)格  

LONZA  50121 InCert Agarose瓊脂糖粉 1g  

LONZA  50123 InCert Agarose瓊脂糖粉 5g  

⑤高純度瓊脂糖粉

IsoGel瓊脂糖粉

于等電聚焦電泳（IEF），減少靜息的陽離子及運(yùn)動陽離子的制造程序使之具有檢測不到的EEO。除了能灌制垂直及水平的薄膠外，還具有足夠的強(qiáng)度用于在垂直管內(nèi)制膠。

IsoGel瓊脂糖粉的應(yīng)用：等電聚焦電泳。

廠家品牌 貨號      產(chǎn)品名稱        包裝規(guī)格  

LONZA  50202 Iso Gel Agarose瓊脂糖粉 25g  

大量現(xiàn)貨

LONZA SeaKem® Gold Agarose金瓊脂糖粉，超長DNA凝膠電泳

產(chǎn)品英文名 SeaKem® Gold Agarose

產(chǎn)品中文名 SeaKem®金瓊脂糖粉

適用：長片段及超長片段DNA跑膠

SeaKem® Gold Agarose是一種高凝膠強(qiáng)度，低EEO（電滲），標(biāo)準(zhǔn)凝膠溫度的瓊脂糖。這種遺傳學(xué)技術(shù)級別（Genetic Technology Grade™ Agarose）的瓊脂糖zui適于在脈沖場凝膠電泳法（pulsed field gel electrophoresis-PFGE）實(shí)驗中快速分辨巨大堿基對DNA：長片段及超長片段DNA。由于SeaKem®Gold Agarose金膠瓊脂糖的低EEO特性，在SeaKem®Gold瓊脂糖凝膠電泳實(shí)驗中，DNA電泳遷移率遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過傳統(tǒng)的瓊脂糖凝膠電泳。PFGE的跑膠時間依使用的緩沖液和瓊脂糖濃度的不同可減少至原電泳時間的50%。因其高凝膠強(qiáng)度，即使是使用低濃度（0.5%的SeaKem Gold瓊脂糖凝膠），操作處理依然很方便，從而允許在常規(guī)電泳中分離更大的DNA fragment并減少PFGE中的DNA分離的耗時。為了更好的在PFGE電泳后對大片段DNA fragment回收，推薦使用 SeaPlaque™ GTG™ Agarose和ß-Agarase。

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